圆果黄麻成熟叶片总DNA提取及SRAP扩增体系的建立与优化

• 作者: 徐建堂 祁建民 陈晖 陈燕萍 陈美霞 陶爱芬
• 来源期刊: 《福建农林大学学报（自然科学版）》
• 关键词: 圆果黄麻 DNA提取 SRAP反应体系
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 作物科学
• 页码范围: 461-466
• 分类号: S563.4
• 语种: 中文

摘要

采用改良的CTAB法从圆果黄麻成熟叶片中提取基因组DNA,对DNA进行电泳检测、含量测定和SRAP分析,并对黄麻SRAP-PCR反应体系中主要影响因子进行了优化,建立了最佳反应体系.结果表明,改良的CTAB法能够提取高质量的DNA,DNA纯度和完整性都较好,经紫外分光光度计测定,D260nm/D280nm均在1.7-1.9之间,无降解现象,蛋白质、多糖类等去除彻底.所建立的SRAP最佳反应体系(25 μL)中5种成分的适宜浓度及用量分别为:Taq DNA聚合酶1.75 u,Mg2+3.0 mmol·L-,dNTPs 0.16 mmol·L-1,引物0.51 μmol · L-1,模板DNA 80-120 ng.