停乳链球菌内蒙分离株抗原基因MIG的克隆和表达

• 作者: 刘金晔 张爱荣 白龙 郝永清
• 来源期刊: 内蒙古农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 乳房炎停乳链球菌 MIG蛋白 克隆 原核表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2011,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学与动物医学
• 页码范围: 42-46
• 分类号: S852.61
• 字数: 3366字
• 语种: 中文

摘要

停乳链球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌,根据GenBank中登陆的停乳链球菌表面蛋白MIG基因序列,设计一对引物,采用PCR的方法从临床分离的停乳链球菌内蒙分离株基因组DNA中扩增出MIG基因,得到1条1 900bp的片段.将其连入PMD - 19T载体中,经酶切,PCR及序列测定法进行鉴定.结果表明,MIG基因与GenBank中停乳链球菌MIG基因(AF354651)序列的同源性为95％.构建原核表达载体PET - 32a(+)- MIG,随后转化到大肠杆菌BL21( DH5a)中表达.表达产物进行SDS-PAGE分析后,表达的重组蛋白大小为89 ku.将纯化的MIG重组蛋白免疫兔,用ELISA检测其血清抗体.用制备出的抗血清与链球菌全菌进行玻片凝集试验,出现凝集颗粒.结果表明MIG重组蛋白具有较强的免疫原性,为停乳链球菌疫苗的研制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝永清	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	106	776	15.0	22.0
2	张爱荣	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	36	343	12.0	17.0
3	刘金晔	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	3	0	0.0	0.0
4	白龙	内蒙古农业大学动物科学与医学学院	7	56	4.0	7.0