变性剂对重组牛肠激酶活性的影响

• 作者: 孙黎 李智聪 杨美花 郑丽钦 陈小兰 陈清西
• 来源期刊: 厦门大学学报（自然科学版）
• 学科: 工学
• 关键词: 变性剂 重组牛肠激酶 动力学 抑制作用
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 603-606
• 分类号: TQ925.4
• 字数: 1888字
• 语种: 中文

摘要

肠激酶(EK,EC 3.4.21.9)是一种在基因工程产品中广泛应用的工具酶.以小分子荧光物质Gly-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-β-萘胺为底物,采用荧光跟踪法研究了变性剂盐酸胍、硫脲、尿素对重组牛肠激酶(rEK)活力的影响及抑制动力学.结果表明:盐酸胍、硫脲、尿素均对该酶的活性有较强的抑制作用,它们对该酶的半抑制浓度(IC50)分别为0.025,0.080和0.750 rnol/L.研究的3种变性剂对该酶的抑制均显示可逆抑制机理;抑制类型也均为竞争性类型,测定它们对酶的抑制常数K1分别为0.015,0.060和0.553 mol/L.