牛肠激酶轻链基因的构建与原核表达

• 作者: 吕永通 回晶 李文燕 杨帆 胡风庆 赵小慧
• 来源期刊: 辽宁大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 肠激酶 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 生物与环境科学
• 页码范围: 12-14
• 页数: 3页
• 分类号: Q781
• 字数: 1810字
• 语种: 中文

摘要

肠激酶作为一种丝氨酸蛋白酶,能够识别顺序-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,水解赖氨酸C端的肽键.根据NCBI中牛肠激酶基因序列(L19663)设计18条引物,通过重叠延伸拼接PCR技术(SOE-PCR)扩增两端带有酶切位点的牛肠激酶轻链基因.构建表达载体pET32a-EK,表达载体转化E.coli BL21 (DE3),利用IPTG诱导表达嵌合蛋白,并用离子交换柱层析纯化肠激酶,获得了高纯度的重组肠激酶轻链蛋白,为大规模生产打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	回晶	辽宁大学生命科学院生物材料与生物制药实验室	20	175	7.0	13.0
2	胡风庆	辽宁大学生命科学院生物材料与生物制药实验室	39	202	7.0	12.0
3	吕永通	辽宁大学生命科学院生物材料与生物制药实验室	8	47	4.0	6.0
4	赵小慧	辽宁大学生命科学院生物材料与生物制药实验室	5	7	2.0	2.0
5	杨帆	辽宁大学生命科学院生物材料与生物制药实验室	55	80	5.0	6.0
6	李文燕	辽宁大学生命科学院生物材料与生物制药实验室	1	2	1.0	1.0