脱氧雪腐镰刀菌烯醇对人胚胎膝关节软骨细胞的毒性及作用机制

• 作者: 丁国永 侯海峰 叶文静 李群伟 李金平 焦鹏
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 软骨细胞 毒性试验 分子作用机制 脱氧雪腐镰刀菌烯醇
• 年，卷（期）: 2011,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 629-632
• 分类号: R684
• 字数: 3216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-9624.2011.07.013

摘要

目的 探讨脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对人胚胎膝关节软骨细胞的毒性及作用机制.方法 取原代培养人胚胎膝关节软骨,用DMEM/F12培养基进行培养和传代,在培养基中加入DON,建立以下DON染毒浓度:0.1、0.2、0.4、1.0 μg/ml组和空白对照组.在处理72 h后进行相关研究指标的检测:分别用ELISA法检测培养上清基质金属蛋白酶13(MMP-13)、前列腺素E2(PGE2)含量,硝酸还原酶法检测上清液的一氧化氮(NO)含量,流式细胞术法检测软骨细胞凋亡情况、软骨细胞内诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和Ⅱ型胶原表达的情况,RT-PCR法分析iNOS mRNA和Ⅱ型胶原mRNA的表达.结果 DON组凋亡率为6.78%～19.05%,高于对照组的1.20%,凋亡率随DON浓度增高而增加(F=174.761,P<0.05).DON组上清液NO含量为20.8～40.7 μmol/L,高于对照组的10.2 μmol/L(F=91.966,P<0.05);MMP-13含量为0.25～0.56 μmol/L,高于对照组的0 μmol/L(F=78.420,P<0.05);PGE2含量为3.2～20.6 μmol/L,高于对照组的1.6 μmol/L(F=276.453,P<0.05).DON组软骨细胞iNOS表达强度为14.8%～56.8%,高于对照组7.1%(F=214.614,P<0.05).高剂量DON组(0.4 μg/ml和1.0 μg/ml)Ⅱ型胶原表达强度分别为56.7%和52.7%,低于对照组的62.2%(F=5.134,P<0.05).DON组软骨细胞内iNOS mRNA表达的吸光度值(A值)为1.07～1.33,高于对照组的0.62(F=8.358,P<0.05).高剂量DON组(0.4、1.0 μg/ml)软骨细胞内Ⅱ型胶原mRNA表达量分别为0.83和0.82,低于对照组的1.14(F=7.887,P<0.05).结论 DON导致人软骨细胞合成NO增加,并通过NO调节MMP-13和PGE2等促进Ⅱ型胶原等软骨基质的降解和软骨毒性损伤;DON可促进软骨细胞的凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	侯海峰	泰山医学院流行病学研究所	53	265	8.0	13.0
2	李群伟	泰山医学院流行病学研究所	59	373	10.0	16.0
3	丁国永	泰山医学院流行病学研究所	27	94	5.0	7.0
4	焦鹏	泰山医学院生命科学研究所	26	166	8.0	11.0
5	叶文静	泰山医学院生命科学研究所	23	180	9.0	12.0
6	李金平	泰山医学院流行病学研究所	5	26	4.0	5.0