Trim22缺失突变体真核表达载体的构建

• 作者: 刘永云 周荣佼 孙大康 安新业 宿振国
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 三基序蛋白22 缺失突变体 艾滋病病毒
• 年，卷（期）: 2011,（5）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 428-432,436
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的:构建Trim22缺失突变体的真核表达载体,为进一步研究Trim22与HIV-1衣壳蛋白的相互作用奠定基础.方法:以野生型Trim22真核表达质粒为模板,用PCR方法扩增出5种类型Trim22缺失突变体的基因片段,克隆到5-Flag-pcDNA3.1(+)真核表达载体,通过酶切、菌落PCR及测序进行鉴定.将该载体转染HEK293T细胞,用蛋白印迹及免疫沉淀检测Trim22缺失突变体的蛋白表达.结果:通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建5种人Trim22缺失突变体的表达载体,载体均可以在HEK293T细胞巾表达.结论:成功构建5种人Trim22缺失突变体的真核表达载体,为探寻Trim22与HIV-1衣壳蛋白相互作用的关键结构域奠定了基础.