重组鼠疫汉坦钩端多抗原位点同源合成基因的表达及活性鉴定

• 作者: 宋秀玲 张士尧 徐卉 徐国良 李娟 杨怀宁 浦昀 盂日增 齐燕飞
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 鼠疫 汉坦病毒 钩端螺旋体 合成基因 基因表达 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 84-87
• 分类号: Q75|O69
• 字数: 2485字
• 语种: 中文

摘要

将人工合成的含鼠疫耶尔森氏菌的2个抗原位点、汉坦病毒的5个抗原位点和钩端螺旋体的5个抗原位点的串联基因片段克隆到原核表达载体pET-20b中,构建重组表达质粒pET-rYHL.转化E.coli BL21(DE3)后获得表达菌株.表达菌株经IPTG诱导后,可高效表达带组氨酸标签的以包涵体形式存在的融合蛋白.包涵体蛋白经尿素变性溶解、His Trap HP Kit柱纯化、SDS-PAGE及Western B1ot分析研究,结果表明,在分子量40000处有一特异性蛋白条带,获得纯度达98%以上的蛋白.进一步ELLSA试验表明,该蛋白与鼠疫、流行性出血热及钩端螺旋体病阳性血清均能较好地结合,而与其它鼠传疾病血清无交叉反应.