狂犬病病毒糖蛋白基因重组慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘晔 张守峰 房丽君 扈荣良 王颖 黄世威
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 狂犬病病毒 糖蛋白类 慢病毒 绿色荧光蛋白质类
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 页码范围: 130-132,140
• 分类号: R373.9|Q782
• 语种: 中文

摘要

目的 构建狂犬病病毒SRV9株糖蛋白基因重组慢病毒表达载体,并进行鉴定.方法 将狂犬病病毒SRV9株糖蛋白基因克隆至慢病毒载体pLVX-ZsGreen-IRES上,筛选阳性重组克隆.将质粒pLVX-ZsGreen-IRES-SRV9G、包膜质粒pMD2.G和包装质粒psPAX2共转染293T包装细胞系,通过荧光显微镜观察报告基因表达情况.收集上清,经浓缩后接种293T细胞,进行重组慢病毒感染细胞的鉴定;用限制性内切酶切除质粒pLVX-ZsGreen-IRES-SRV9G绿色荧光蛋白基因,采用直接免疫荧光试验检测狂犬病病毒糖蛋白的表达情况.结果 重组慢病毒表达载体经酶切和测序证明构建正确.荧光显微镜下可见重组慢病毒感染的293T细胞有大量绿色荧光出现,病毒滴度为3×107 IU/ml;直接免疫荧光检测表明,糖蛋白基因在293T细胞内获得有效表达.结论成功构建了狂犬病病毒SRV9株糖蛋白基因重组慢病毒载体,为狂犬病基因工程疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张守峰	军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室	65	311	9.0	13.0
2	刘晔	军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室	35	198	7.0	12.0
3	王颖	军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室	16	60	4.0	6.0
4	黄世威	吉林大学畜牧兽医学院	6	13	2.0	3.0
5	房丽君	吉林大学畜牧兽医学院	2	4	1.0	2.0