珙桐cpDNA非编码序列引物反应条件优化与筛选

• 作者: 安静 张玉梅 徐刚标 谷振军
• 来源期刊: 中南林业科技大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 珙桐 cpDNA 非编码序列 引物筛选
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 页码范围: 183-186
• 分类号: Q51
• 字数: 2341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-923X.2011.03.038

摘要

实验采用改良CTAB方法提取总DNA,以珙桐及其近缘种基因组DNA为材料,优化cpDNA非编码序列PCR扩增条件,优据优化的PCR扩增条件,首次筛选出适合于珙桐分子谱系地理学研究的cpDNA非编码序列和引物.结果表明:25μL PCR反应体系中含有50 ng DNA,10×Buffer,2.5 mmol MgCl2,0.4 mmol dNTPs,0.2 μmol primerl,0.2 μmol primer2,1.25 U Pfu DNA Polymerase.适宜的PCR反应程序为94℃5 min,94℃1 min,退火时间45 s,退火温度和72℃延伸时间依不同的引物和产物而不同,35个循环,72℃总延伸7 min.稳定性好的、扩增条带清晰且单一的trnSGCU和trnGUUC、F71和R1516、rps16-F和rps16-R、atpB-49和rbcL-188四对引物可作为进一步珙桐分子谱系地理学研究的引物.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐刚标	中南林业科技大学林木遗传育种实验室	75	755	14.0	24.0
2	张玉梅	中南林业科技大学林木遗传育种实验室	6	67	4.0	6.0
3	谷振军	中南林业科技大学林木遗传育种实验室	8	80	5.0	8.0
4	安静	中南林业科技大学林木遗传育种实验室	3	27	3.0	3.0