猪BMP4基因原核表达及优化

• 作者: 周建设 张驰 李明 石晓卫 赵巧辉 陈其新
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 骨形态发生蛋白4 原核表达 条件
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 24-28,64
• 分类号: S813.3
• 字数: 5040字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-1389.2011.01.005

摘要

构建猪BMP4基因pET32a-BMP4原核表达质粒,在E.coli中表达并分离纯化目的蛋白.采用PCR技术以pMD18-T-BMP4重组质粒为模板扩增获得BMP4基因编码成熟肽片段,并插入到原核表达载体pET32a中,构建原核表达重组质粒pET32a-BMP4.将阳性重组质粒转化到表达宿主菌中,在不同的温度、IPTG浓度和时间下进行诱导表达,SDS-PAGE分析鉴定.构建的重组表达质粒经PCR、酶切和DNA测序鉴定与预期的结果一致,表达宿主菌经IPTG诱导表达分子量约为31 ku的融合蛋白,表达产物占菌体总蛋白的30%以上.成功构建了pET32a-BMP4原核表达质粒,并经纯化得到BMP4目的蛋白,为进一步研究该蛋白的结构和功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李明		76	525	11.0	19.0
2	陈其新		31	114	7.0	8.0
3	石晓卫		25	32	3.0	4.0
4	赵巧辉		6	3	1.0	1.0
5	周建设		10	16	2.0	3.0
6	张驰		4	3	1.0	1.0