重组VEGF165在哺乳动物细胞中表达及其生物学活性

• 作者: 曹玉珏 李冬海 贺立新 马彩虹
• 来源期刊: 临床和实验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: VEGF165 转染 筛选 表达 鉴定 活性
• 年，卷（期）: 2011,（18）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1411-1414
• 分类号: R363
• 字数: 3600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-4695.2011.18.005

摘要

目的 构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-血管内皮生长因子(VEGF)165并在哺乳动物细胞中实现目的 基因的表达,对目的 蛋白进行鉴定和生物学活性分析.方法 分子生物学方法将扩增的VEGF165基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+),在脂质体介导下将重组质粒转染至哺乳动物细胞NIH 3T3并进行抗生素压力筛选,采用双抗夹心ELISA、SDS-PAGE和免疫印迹方法对目的 蛋白在转染细胞中的特异表达进行鉴定,在血管内皮细胞ECV304上对表达产物的细胞结合活性和促增殖活性进行分析.结果 构建的真核表达载体pcDNA3.1(+)-VEGF165成功转染NIH 3T3,获得加压筛选的重组细胞,目的 基因得到稳定表达,目的 蛋白能与血管内皮细胞ECV304特异结合,并具有促内皮细胞增殖活性.结论 应用pcDNA3.1(+)-VEGF165载体转染的NIH 3T3细胞可稳定表达具生物学活性的VEGF165重组蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贺立新	北京丰台右安门医院烧伤科	26	115	6.0	8.0
2	李冬海	北京丰台右安门医院烧伤科	25	86	5.0	7.0
3	曹玉珏	北京丰台右安门医院烧伤科	36	114	6.0	7.0
4	马彩虹	北京丰台右安门医院烧伤科	17	52	4.0	5.0