利用RNA干扰技术构建IER5-SiRNA-Hela 细胞系

• 作者: 丁库克 乔茶 周平坤 徐勤芝 李莉 杨川杰 赵焕英 郝淳 鲁苇媛
• 来源期刊: 中国实验诊断学
• 学科: 生物学
• 关键词: Real-Time PCR IER5基因 早期反应基因
• 年，卷（期）: 2011,（1）
• 页码范围: 3-6
• 分类号: Q782
• 字数: 3551字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2011.01.002

摘要

目的 观察小干扰RNA(siRNA)转染Hela细胞后,对IER5基因抑制效果,筛选出高效的siRNA转染质粒.方法 利用siRNA设计软件,将设计好的RNA片断插入到siRNA表达质粒载体PsilencerTM 3.1-H1 hygro中,测序正确后转染至Hela细胞中.利用Real-time PCR的方法,测定siRNA对Hela细胞中IRE5的抑制效果.结果 在mRNA水平及Western blot测试,IER5-siRNA-Hela细胞的IER5基因mRNA表达抑制效果明显.从细胞形态上讲,IER5-siRNA-Hela细胞与正常Hela细胞相比,IER5-siRNA-Hela细胞比Hela细胞体积大.结论 本实验成功的获得了特异性抑制IER5基因的IER5-siRNA-Hela细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李莉		206	831	15.0	20.0
2	杨川杰		8	35	4.0	5.0
3	赵焕英		55	178	7.0	11.0
4	周平坤	军事医学科学院放射毒理研究室	108	511	11.0	16.0
5	鲁苇媛		1	4	1.0	1.0
6	郝淳		1	4	1.0	1.0
7	乔茶		1	4	1.0	1.0
8	徐勤芝	军事医学科学院放射毒理研究室	1	4	1.0	1.0