靶向白介素-1α基因沉默的Hela229稳定细胞系的构建

• 作者: 余平 张丽娜 张宁洁 李伟 林琳 程文 高劲松
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: IL-1α Hela229细胞 shRNA
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 441-446，440
• 页数: 7页
• 分类号: Q78
• 字数: 4224字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2013.05.009

摘要

目的:构建针对IL-1α基因的shRNA表达载体,筛选能够抑制Hela229细胞内源性IL-1α表达的shRNA,建立无内源性IL-1d表达的Hela229稳定细胞系.方法:根据shRNA的设计原则,以IL-1 αcDNA oligo为模板设计一段21 bp核苷酸目标序列,构建成siRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo中,获得靶向抑制IL-1α基因的重组shRNA质粒,转染Hela229细胞,经G418筛选后获得单克隆稳定细胞株,用ELISA方法在蛋白水平上检测IL-1α基因的沉默效果.结果:经酶切鉴定和测序分析确定IL-1 α-shRNA重组质粒构建正确,ELISA筛选出能够显著抑制内源性IL-1α表达的shRNA,获得沉默内源性IL-1 α表达的单克隆稳定的Hela229细胞株.结论:靶向IL-1α基因的重组shRNA表达质粒可显著抑制Hela229细胞内源性IL-1α的表达,成功构建靶向IL-1α基因沉默的Hela229稳定细胞系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宁洁	中南大学基础医学院免疫系	9	22	3.0	3.0
2	林琳	中南大学基础医学院免疫系	32	230	8.0	14.0
3	余平	中南大学基础医学院免疫系	102	374	10.0	14.0
4	李伟	中南大学基础医学院免疫系	87	364	10.0	15.0
5	张丽娜	中南大学基础医学院免疫系	53	327	11.0	16.0
6	程文	中南大学基础医学院免疫系	13	47	4.0	6.0
7	高劲松	长治医学院基础部免疫学教研室	1	1	1.0	1.0