稳定整合靶向EGFL7基因的shRNA载体的胶质瘤细胞系的建立

• 作者: 刘清流 张峰
• 来源期刊: 中国医药科学
• 学科: 医学
• 关键词: 人类表皮生长因子域7 shRNA RNA干扰 U251 胶质瘤
• 年，卷（期）: 2011,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 41-42
• 分类号: R730.54
• 字数: 1759字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建针对EGFL7基因的特异性RNA干扰载体,建立稳定转染该干扰载体的人胶质瘤细胞系.方法 根据EGFL7基因的编码序列设计并合成针对EGFL7基因的特异性shRNA,将其克隆人pSilencer 3.1-H1 neo载体中,重组载体经脂质体Lipofectamine<'TM> 2000介导转染胶质瘤细胞株U251;转染细胞经G418筛选,采用Western blot方法在蛋白水平检测筛选出的G418抗性的克隆细胞.结果 酶切鉴定和测序证实,成功构建了靶向EGFL7基因的shRNA真核表达载体pSilencer-shEGFL7,并获得了稳定表达靶向EGFL7基因的shRNA的胶质瘤细胞株.结论 EGFL7基因特异性RNA干扰载体能够显著抑制EGFL7基因在U251细胞中的表达,这为进一步研究EGFL7在胶质瘤细胞系U251中的生物学功能和作用机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘清流	广州医学院第二附属医院神经外科	5	13	3.0	3.0
2	张峰	广州医学院第二附属医院神经外科	2	4	1.0	2.0