重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a的构建与表达

• 作者: 吴丽萍 廖志苏 张春鸿 方潇碧 施清圆 李文峰 林森 黄亚 黄振校
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 质粒 16-1/15a-X2370G CNE-2Z 构建 表达
• 年，卷（期）: 2011,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2108-2110
• 分类号: R34
• 字数: 2782字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2011.12.004

摘要

目的:构建针对人鼻咽癌CNE-2Z细胞Bcl-2基因pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16.1/15a真核表达质粒,转染至CNE-2Z细胞并检测其表达.方法:采用PCR法从重组质粒PGH-16-1/15a中获得16-1/15a-X2370G全长序列,在T4 DNA Ligase连接酶作用下连接入重组载体pENTR-CMV-EGFP.重组质粒经酶切及测序鉴定.将构建成功的重组质粒转染入人鼻咽癌细胞株CNE-2Z,用荧光显微镜观察转染结果.结果:重组质粒pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a经酶切与测序证实构建成功,转染至鼻咽癌CNE-2Z细胞后,荧光显微镜观察证实该重组质粒能在CNE-2Z中表达.结论:成功构建真核表达质粒DENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16-1/15a,并在鼻咽癌CNE-2Z细胞中得到表达,可用于进一步检测其抗肿瘤机制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方潇碧	温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科	8	41	5.0	6.0
2	张春鸿	温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科	6	25	3.0	5.0
3	黄亚	浙江省温州市第八人民医院耳鼻咽喉科	1	0	0.0	0.0
4	林森	温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科	8	35	4.0	5.0
5	黄振校	温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科	5	14	2.0	3.0
6	吴丽萍	温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科	3	3	1.0	1.0
7	施清圆	温州医学院附属第一医院耳鼻咽喉科	2	1	1.0	1.0
8	李文峰	温州医学院附属第一医院放疗科	35	197	8.0	12.0