羊布鲁氏菌omp25基因原核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 吴岩 毕力夫 石艳春 郑源强 韩堃
• 来源期刊: 内蒙古医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 羊布鲁氏菌 omp25 原核表达载体 克隆 鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 89-93
• 分类号: R392.11
• 字数: 2848字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-2113.2012.02.001

摘要

目的:利用PCR反应从羊布鲁氏菌基因组DNA中克隆omp25基因,并将其构建到原核表达载体pET -32a中.方法:试剂盒法提取羊布鲁氏菌基因组DNA,设计合适的引物,通过PCR反应从基因组中扩增外膜蛋白OMP25的编码基因(omp25).将得到的基因片段连接到克隆载体pMD19 -T的多克隆位点(MCS)中,将连接体pMD19 -T - omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析与序列测定.利用酶切与连接反应将目的基因( omp25)插入载体pET -32a的多克隆位点中,将连接体pET -32a -omp25转化感受态大肠杆菌DH5(并进行筛选和克隆扩增,提取质粒并进行酶切分析.结果:PCR扩增得到的基因片段与GenBank中已公布的羊布鲁氏菌omp25基因同源性为99％.酶切分析结果表明,omp25基因成功地插入载体pET -32a中.结论:成功地扩增得到了羊布鲁氏菌omp25基因并构建了携带该基因的重组原核表达载体pET-32a-omp25,为后续的研究提供了可靠的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴岩	内蒙古医学院基础医学院	80	613	14.0	19.0
2	毕力夫	内蒙古医学院基础医学院	86	744	16.0	22.0
3	石艳春	内蒙古医学院基础医学院	28	156	6.0	11.0
4	郑源强	内蒙古医学院基础医学院	46	269	8.0	14.0
5	韩堃	天津医科大学基础医学研究中心	4	8	2.0	2.0