不同方式重组表达鼠疫caf1M蛋白的研究

• 作者: Tiffany C.Ho 宋志忠 张建中 杜春红 王鹏 董兴齐
• 来源期刊: 中国地方病防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼠疫 caf1M蛋白 重组表达
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 81-84
• 页数: 4页
• 分类号: R516.8
• 语种: 中文

摘要

目的 对比不同方式克隆表达鼠疫耶尔森氏菌caf1M蛋白的存在状态及免疫学活性.方法 分别选择3种不同载体pET32a(+)、pGEX4t -1、pGBTNH,克隆表达鼠疫caf1M蛋白；并以鼠疫菌免疫血清分别检测其免疫学活性.结果 成功构建了4个重组质粒,分别是含去除信号肽编码序列caf1M基因的3个质粒载体,及1个含有完整caf1M基因的pGEX4t -1表达质粒；4个质粒经诱导均在大肠杆菌中得到高效表达；存在状态分析表明,含有去除信号肽编码序列caf1M基因的pGEX4t -1表达的重组蛋白以可溶方式存在,其余3种以包涵体形式存在；重组蛋白与鼠疫菌免疫血清的Western blot分析表明,除pGBTNH表达的蛋白存在非特异反应外,其余3种重组蛋白都发生特异性反应.结论 成功克隆表达了4种鼠疫菌caf1M蛋白,其中3种具有良好的特异性免疫反应性；信号肽序列及载体都对重组caf1M蛋白的表达有影响.