抗草甘膦转基因大豆DNA标准分子构建及多重荧光PCR检测体系的建立

• 作者: 刘小青 杨国武 洪晓明 赖心田 陈国培
• 来源期刊: 检验检疫学刊
• 学科: 农学
• 关键词: 抗草甘膦转基因大豆 多重实时荧光定量PCR 转基因成分检测
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 页码范围: 4-7
• 页数: 4页
• 分类号: S565.1

摘要

[目的]将抗草甘膦转基因大豆中的CaMV35S、NOS和CP4 EPSPS 3种外源基因融合在PMD-18T载体并建立三重实时荧光PCR检测方法,实现通过一次PCR反应就能完成抗草甘膦转基因大豆的转基因成分检测。[方法]通过PCR扩增和基因克隆的方法构建含有CaMV35S、NOS和CP4 EPSPS外源基因的质粒,设计TaqMan探针建立三重荧光PCR检测体系。[结果]成功构建融合抗草甘膦转基因大豆3种外源基因质粒PMD18T/SOY,并建立三重荧光PCR检测体系,检测限值为10-3 ng/μL,线性关系良好r,2在0.998以上。[结论]构建同时含有多种外源基因的质粒作为转基因检测的阳性参照物并建立多重PCR检测体系,不仅可降低试剂成本、节省时间和人力,而且可以减少PCR反应次数和加样环节,降低PCR污染的几率。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赖心田		46	105	6.0	8.0
2	杨国武		79	184	7.0	9.0
3	刘小青		14	8	1.0	2.0
4	陈国培		17	23	2.0	4.0
5	洪晓明		5	0	0.0	0.0