重组表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 余英豪 刘伟
• 来源期刊: 中国比较医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒载体 293T细胞 MIP-1α基因 B7-1基因 淋巴瘤
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 54-61
• 分类号: R733.1|R332
• 字数: 5577字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671.7856.2012.001.013

摘要

目的 构建重组表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的慢病毒载体,为淋巴瘤基因治疗的实验研究奠定基础.方法 设计引物扩增获得目的基因小鼠MIP-1α和B7-1基因的全长编码序列cDNA,将目的基因与经酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,其产物转化感受态细胞,对长出的阳性克隆进行PCR鉴定和直接测序序列分析.MIP-1α和B7-1目的基因质粒转染293T细胞,观察绿色荧光蛋白(GFP)表达,采用Western Blot法检测其蛋白表达,实时荧光定量PCR,检测慢病毒浓缩液的滴度.结果 成功构建了重组表达小鼠MIP-1α和B7-1基因的慢病毒载体,实时荧光定量PCR证实MIP-1α、B7-1基因重组慢病毒载体的滴度均达2.00E+8 TU/mL.结论 本研究成功构建并包装出高滴度的小鼠MIP-1α和B7-1基因重组慢病毒载体,为淋巴瘤基因治疗的实验研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘伟	中国人民解放军南京军区福州总医院病理科	277	1964	21.0	39.0
2	余英豪	中国人民解放军南京军区福州总医院病理科	11	39	3.0	5.0