正交设计优化紫萼藓科植物的ISSR - PCR反应体系

• 作者: 于冰 刘卓 沙伟
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 紫萼藓科 正交设计 ISSR-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 61-65
• 分类号: Q781|Q949
• 字数: 3225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-311X.2012.03.69

摘要

目的:建立紫萼藓科(Grimmiaceae)植物ISSR - PCR反应的最佳体系.方法:通过L16(45)正交试验,研究了dNTP浓度、镁离子浓度、模板DNA浓度、引物浓度、Taq DNA聚合酶浓度这5个因素在4个水平上对ISSR - PCR的影响.结果:建立了紫萼藓科ISSR - PCR反应的最佳反应体系,其中dNTPs浓度为0.8mmol/L、Mg2+浓度为3.0mmol/L、模板为15ng、引物浓度为1.4 μmol/L、Taq酶量2U,总体积为25μl.反应程序为:扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性30s,48～52℃退火1min,72℃延伸2min,共40个循环;72C延伸10min;4℃保存.采用引物UBC812等均能够得到有效扩增.结论:该优化体系的建立为下一步对紫萼藓进行ISSR分子标记奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沙伟	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	160	1730	21.0	34.0
2	于冰	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	6	12	2.0	3.0
3	刘卓	齐齐哈尔大学生命科学与农林学院	6	15	2.0	3.0