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摘要:
为将微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)P23基因在巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)系统中进行表达,利用表达蛋白初步建立隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,设计引物从微小隐孢子虫基因组DNA中扩增P23基因序列,构建pPIC9K-P23重组质粒,在毕赤酵母中进行表达,用阴离子交换层析柱进行纯化。以重组P23纯化蛋白为抗原建立间接ELISA检测方法,对现场采集的猪血清样品进行检测。SDS-PAGE显示所表达的蛋白大小约为23 kDa。Western blot检测表明该蛋白能与兔抗P23蛋白血清特异性结合。用建立的间接ELISA技术对186份猪血清样品进行检测,阳性率为83.3%。本研究获得了真核表达的P23重组蛋白,初步建立了微小隐孢子虫病间接ELISA诊断技术,为隐孢子虫病的诊断和流行病学调查打下了基础。
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ELISA
IFAT
内容分析
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文献信息
篇名 微小隐孢子虫P23基因在毕赤酵母中的表达及初步应用
来源期刊 中国动物传染病学报 学科 农学
关键词 微小隐孢子虫 P23基因 巴斯德毕赤酵母 真核表达
年,卷(期) 2012,(6) 所属期刊栏目 研究论文
研究方向 页码范围 56-62
页数 7页 分类号 S852.723
字数 3334字 语种 中文
DOI
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研究主题发展历程
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微小隐孢子虫
P23基因
巴斯德毕赤酵母
真核表达
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中国动物传染病学报
双月刊
1674-6422
31-2031/S
大16开
上海市闵行区紫月路518号
1993
chi
出版文献量(篇)
2151
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1
总被引数(次)
8579
相关基金
上海市科技兴农重点攻关项目
英文译名:
官方网址:http://www.xmgl.org/dl_download.htm
项目类型:
学科类型:
论文1v1指导