隐孢子虫P23基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 周鹏 呼高伟 张国恩 秦培兰 米荣升 胡义彬 苏庆美 陈兆国 黄燕
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 隐孢子虫鼠基因型 P23基因 原核表达 间接ELISA
• 年，卷（期）: 2011,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 43-50
• 分类号: S852.723|Q7
• 字数: 6028字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-6422.2011.02.009

摘要

将隐孢子虫鼠基因型（Cryptosporidium mouse genotype）P23基因亚克隆到pGEX-4T-1载体中,并用大肠杆菌BL21（DE3）为宿主菌诱导表达。以纯化的rP23为诊断抗原,建立隐孢子虫间接ELISA检测方法,观察其敏感性、特异性和重复性,并对临床血清样品进行检测。结果隐孢子虫鼠基因型P23基因在大肠杆菌中获得了高效表达,Western blot检测显示rP23能被隐孢子虫感染兔血清识别。以纯化rP23为诊断抗原,成功地建立了检测兔隐孢子虫病的间接ELISA技术。对23份临床血清检测结果显示,该方法检出率高于Sheather＇s蔗糖漂浮法、套式PCR法。本研究结果为研制兔隐孢子虫病诊断试剂盒打下了基础。