微小隐孢子虫P23抗原在重组干酪乳杆菌中的分泌表达及其免疫原性

• 作者: 兰丽 张和平 格日勒图 玄学南 玉斯日古楞 王艳霞 石泉 贾洪林
• 来源期刊: 寄生虫与医学昆虫学报
• 学科: 医学
• 关键词: 干酪乳杆菌 微小隐孢子虫 P23蛋白 分泌表达
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 著述
• 页码范围: 1-7
• 分类号: R382.3
• 字数: 4751字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-0507.2012.01.001

摘要

本实验以微小隐孢子虫 Cryptosporidium parvum 子孢子抗原P23基因和信号肽基因Usp45为材料,构建干酪乳杆菌 Lactobacillus casei 中分泌表达P23蛋白的重组载体pMG-Usp45-P23.在培养物上清和细菌裂解组分中,分别以SDS-PAGE、Western blotting、IFAT和ELISA等不同方法检测P23蛋白的分泌和表达情况,并用已获得的P23蛋白分泌产物体外刺激Wistar大鼠淋巴细胞,评价其淋巴细胞转化活性.结果表明,分别在细菌培养物上清和破碎菌体组分中检测到大小约为20 kDa(不含信号肽)和23 kDa (含信号肽)的P23蛋白分泌和表达产物.并且该P23蛋白分泌产物与ConA相当,具有显著的淋巴细胞转化活性.本实验为进一步研制动物微小隐孢子虫 C.parvum 活菌疫苗载体的构建奠定了基础.