HPV16 L2肽段偶联AP205 VLP的原核表达及免疫原性分析

• 作者: 姜博 姬秋彦 张营营 徐维明 李智华 毕研伟 蔡路奎
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人乳头瘤状病毒 L2蛋白 AP205
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-6
• 分类号: Q786
• 语种: 中文

摘要

目的:将编码HPV16衣壳蛋白L2的65～71、112～120免疫优势表位连接到RNA噬菌体衣壳蛋白AP205氮端,组装形成病毒样颗粒,通过在大肠杆菌中实现表达及纯化,对其免疫原性进行研究.方法:合成编码AP205衣壳蛋白基因和HPV16 L2的65 ～71、112～120位氨基酸表位的基因序列,PCR连接并克隆至pET30a(+)原核表达载体,构建重组表达质粒pET30-AP205 -HPV16△L2,转化大肠杆菌BL21( DH3)感受态细胞,IPTG诱导表达.表达蛋白经凝胶层析纯化及SDS-PAGE、Western blot等理化性质检测,免疫接种ICR小鼠,通过间接ELISA法检测其免疫原性.结果:成功构建重组表达质粒,重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性表达,透射电镜观察可见典型病毒样颗粒,该VLP在动物实验中表现出较好的免疫原性.结论:成功将HPV162表位偶联AP205以形成VLP,在大肠杆菌中实现可溶性表达.