嗜水气单胞菌实时荧光三重TaqMan PCR快速检测体系的建立

• 作者: 叶长芸 孟双 王艳 白雪梅
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 嗜水气单胞菌 实时荧光TaqMan PCR 气溶素基因 丝氨酸蛋白酶基因
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 217-222
• 分类号: R378
• 字数: 4401字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2012.03.006

摘要

目的 建立针对嗜水气单胞菌的高灵敏、高特异的实时荧光三重TaqMan聚合酶链式反应(PCR)快速检测体系.方法 根据嗜水气单胞菌的16S rDNA、气溶素基因(aerA)和丝氨酸蛋白酶基因(ahp)的特异性序列设计引物及TaqMan探针,利用高通量实时荧光PCR检测平台探讨该检测体系的灵敏度;用29种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌评价该检测体系的特异性.结果 实时荧光三重TaqMan PCR快速检测体系对嗜水气单胞菌重组质粒的检测灵敏度为1×102拷贝/反应体系;对嗜水气单胞菌基因组的检测灵敏度为5×10-2 pg/反应体系;该体系的特异性引物探针在检测29种其他肠道致病菌及院内感染中常见的致病菌时未出现假阳性,整个反应在2 h内完成.结论 本研究建立的实时荧光三重TaqMan PCR检测体系可作为嗜水气单胞菌灵敏、特异、快速的检测方法,并同时评价嗜水气单胞菌的致病潜力.