链间二硫键改善FⅧ基因断裂转移小鼠血浆重链分泌和凝血活性

• 作者: 刘泽隆 屈慧鸽 朱甫祥 缪静 迟晓艳
• 来源期刊: 中国科学（生命科学）
• 关键词: 凝血Ⅷ因子 双载体转基因 链间二硫键 重链分泌 凝血活性
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 538-543
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.1007/sl1427-012-4333-8

摘要

体外细胞培养实验证明,双载体共转重链A2结构域Met662和轻链A3结构域Asp1828突变为Cys的B区缺失型凝血Ⅷ因子(BDD-FⅧ)基因可使共表达的重、轻链形成链间二硫键,重链的分泌水平得到改善.本文进一步观察小鼠体内双载体转此突变体BDD-FⅧ基因后血浆中重链的分泌量和凝血活性.构建一对含Cys662突变重链和Cys1828突变轻链真核表达载体,经门静脉注射双表达载体至C57BL/6小鼠体内,用ELISA法和Coatest法分别检测小鼠血浆中重链的分泌量和凝血活性为(239±56)ng/mL和(1.09±0.25) IU/mL,明显高于双载体共转野生型BDD-FⅧ基因对照小鼠((84±25)ng/mL和(0.36±0.12) IU/mL).结果表明,链间二硫键形成可有效增强转基因小鼠的血浆重链分泌,提高血浆凝血活性,改善双载体转BDD-FⅧ基因功效,为后续应用双AAV载体的血友病基因治疗研究提供实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	屈慧鸽		72	330	10.0	15.0
2	刘泽隆		49	99	7.0	9.0
3	缪静		57	250	10.0	14.0
4	朱甫祥		38	21	3.0	4.0
5	迟晓艳		47	54	4.0	6.0