巨噬细胞特异性真核表达载体的构建与鉴定

• 作者: 夏晓莉 姜翠翠 孙怀昌 宋红芹 尹莉 张鑫宇
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人SR-A启动子 巨噬细胞特异性 表达载体 构建
• 年，卷（期）: 2012,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1067-1069
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆人清道夫受体A(SR-A)启动子,构建巨噬细胞特异性的真核表达载体.方法:从人外周血中提取基因组DNA,采用PCR技术分别扩增人SR-A的启动子及第一内含子和增强子序列,并插入带有绿色荧光蛋白(GFP)基因的真核表达载体pcDNA-GFP中,构建巨噬细胞特异性表达载体pSRA-GFP.将pSRA-GFP转染巨噬细胞和非巨噬细胞,通过荧光显微镜观察和流式细胞术比较GFP在不同细胞中的表达水平.结果:成功克隆SR-A启动子,其在巨噬细胞RAW264.7中的表达活性显著高于NRK、LLC、Hepa1-6等非巨噬细胞株(P＜0.05).结论:构建的表达载体pSRA-GFP具有良好的组织细胞特异性,可用于巨噬细胞特异性miRNA表达载体的构建.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋红芹	扬州大学兽医学院禽类预防医学省部共建教育部重点实验室	23	156	7.0	11.0
2	张鑫宇	扬州大学兽医学院禽类预防医学省部共建教育部重点实验室	40	142	6.0	10.0
3	夏晓莉	扬州大学兽医学院禽类预防医学省部共建教育部重点实验室	24	78	6.0	8.0
4	姜翠翠	扬州大学兽医学院禽类预防医学省部共建教育部重点实验室	3	5	2.0	2.0
5	尹莉	扬州大学兽医学院禽类预防医学省部共建教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0