miRNA-143表达载体构建及表达活性检测

• 作者: 姜星 生安志 白立景 鞠辉明
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 大白猪基因组 miRNA-143 microRNA 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 页码范围: 9-12
• 分类号: S512
• 字数: 2211字
• 语种: 中文

摘要

以大白猪基因组DNA为模板,利用PCR扩增miRNA-143前体序列,构建重组载体pEGP-miR-143,转染猪胎儿成纤维细胞,通过荧光观察转染效率和报告基因表达效率,再利用实时荧光定量PCR (QRT- PCR)测定细胞内miRNA-143的表达,以检测外源基因的表达活性；对PCR产物进行测序鉴定及重组载体酶切验证.结果表明:成功构建了pEGP-miR- 143载体；转染细胞后进行荧光观察,载体中GFP有较好的表达活性；QRT-PCR表明,与对照组细胞相比,试验组miRNA-143表达有显著提升,差异极显著(P＜0.01).说明已成功制备miRNA-143过表达载体,为在动物细胞和体内开展miRNA-143相应的功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鞠辉明	扬州大学兽医学院	27	67	4.0	7.0
2	白立景	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	9	16	2.0	3.0
3	姜星	扬州大学兽医学院	2	11	2.0	2.0
4	生安志	扬州大学兽医学院	1	4	1.0	1.0