猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体的制备和初步鉴定

• 作者: 刘晔 吕宗吉 张守峰 扈荣良 王永志 米立娟
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 N蛋白 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 页码范围: 661-666
• 分类号: S858.28
• 语种: 中文

摘要

克隆了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CC-11株的N基因全序列,将其克隆至原核表达载体pET28a,转化E.coli Rosetta株后经0.5 mmol/L IPTG诱导,获得了高水平表达.对表达的N蛋白进行纯化,以50 μgN蛋白免疫BALB/c小鼠,3次免疫后,取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)进行融合,通过间接ELISA筛选,获得9B12、7C2、7C6共3株稳定分泌抗PRRSV-N蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,亚型鉴定结果分别为IgG2b、IgG1、IgG1亚型.通过Western blot分析和间接免疫荧光测定表明,3株单抗对PRRSV CC-11株、CH-1R和JXA1-R细胞毒以及4份临床疑似病料均发生特异性反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张守峰	军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室	65	311	9.0	13.0
2	刘晔	军事医学科学院军事兽医研究所吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室	35	198	7.0	12.0
3	王永志		9	8	1.0	2.0
4	吕宗吉		12	265	7.0	12.0
5	米立娟	吉林农业大学动物科学技术学院	8	36	4.0	6.0
7	扈荣良	吉林农业大学动物科学技术学院	3	7	1.0	2.0