猪蛔虫抗菌肽Cecropin p基因的克隆及其原核表达载体的构建

• 作者: 刘志刚* 罗伟芝 赵若聪 高安键 魏鹏飞
• 来源期刊: 江西师范大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪蛔虫 Cecropin 2 Cecropin 3 Cecropin 4 载体构建 序列分析
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 页码范围: 542-546
• 分类号: Q78
• 字数: 3092字
• 语种: 中文

摘要

从猪蛔虫提取总RNA,反转录成cDNA后分别设计引物对Cecropin 2、Cecropin 3和Cecropin 4基因进行 PCR 扩增,分别得到带有双酶切位点的目的基因片段.将目的基因片段与 PMD18 T 载体连接,转化Top10克隆菌,测序正确后克隆入 pET28a 表达载体,进行双酶切和测序鉴定.研究结果表明,克隆得到的Cecropin p2、 Cecropin p3和Cecropin p4基因均由225个碱基组成,一个编码由74个氨基酸残基组成的开放阅读框,其蛋白相对分子质量约为8 kD,等电点分别为9.86、10.16和9.16.同源性分析结果显示:克隆所得猪蛔虫Cecropin p2、 Cecropin p3和Cecropin p4与数据库NCBI中的猪蛔虫Cecropin p2、Cecropin p3和Cecropin p4基因同源性均为100%,与其它Cecropin p基因同源性也较高(>42%).分子进化树显示, Cecropin p4的分化出现最早,其次为Cecropin p2, Cecropin p1和Cecropin p3分化得最晚.成功克隆了猪蛔虫Cecropin 2、Cecropin 3和Cecropin 4基因,构建了它们的原核表达载体并进行了生物信息学分析,为其重组表达和抑菌活性鉴定等研究奠定了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏鹏飞	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	2	4	1.0	2.0
2	赵若聪	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	3	23	2.0	3.0
3	罗伟芝	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	2	4	1.0	2.0
4	刘志刚*	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	2	6	1.0	2.0
5	高安键	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	1	1	1.0	1.0