表达藤黄微球菌过氧化氢酶基因的工程大肠杆菌发酵条件优化

• 作者: 张兴群 曹张军 疏翠 郑慧琳 陈婷
• 来源期刊: 食品与药品
• 学科: 生物学
• 关键词: 过氧化氢酶 融合表达 Ni-NTA亲合层析 发酵工艺
• 年，卷（期）: 2012,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 153-158
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3871字
• 语种: 中文

摘要

目的 优化表达重组藤黄微球菌(M.luteus)过氧化氢酶基因工程菌的发酵条件.方法 以生物量和目标蛋白表达量为判断标准,利用单因子试验和正交试验在摇瓶水平优化初始pH、IPTG浓度、诱导时机、诱导时间等影响工程菌发酵制备藤黄微球菌过氧化氢酶的发酵条件.结果 最佳发酵工艺参数:培养基初始pH 6.5,摇床转速180 r/min,装液量75 mL,接种量6％,培养温度37℃,诱导表达时间5h.蛋白表达量比优化前提高近30％,重组蛋白经Ni-NTA纯化和透析后,酶活性为166.0 U/(mg·protein),以实验条件相同野生菌酶活100.0 U/ (mg·protein)为对照,重组酶的酶活性提高66％.结论 工艺优化后,酶表达量及酶活性均显著提高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	疏翠	东华大学化学化工与生物工程学院	2	3	1.0	1.0
2	陈婷	东华大学化学化工与生物工程学院	41	135	7.0	10.0
3	曹张军	东华大学化学化工与生物工程学院	47	163	6.0	11.0