茶树类黄酮3’,5’-羟化酶在大肠杆菌的表达和优化

• 作者: 刘亚军 夏涛 王云生 赵磊 陈啸天 高丽萍
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 茶树 类黄酮3’,5’-羟化酶 RACE 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 茶与食品科学
• 页码范围: 707-713
• 分类号: S571.1
• 语种: 中文

摘要

儿茶素是茶叶主要特征和功能成分之一,其中B环三羟基儿茶素约占儿茶素总量的65％以上.类黄酮3’,5’-羟化酶是类黄酮合成中B环5’羟基化的唯一酶系,与B环三羟基儿荼素合成积累密切相关.采用RACE技术,克隆了茶树类黄酮3’,5’-羟化酶基因的1944 bp的全长序列,开放阅读框区域为55～1 587 bp,编码510个氨基酸,推测其分子量为57.1 kDa,等电点为9.06.该基因重组至pET-32a(+)表达载体上,在大肠杆菌Rosetta中进行原核表达；优化了原核表达中温度诱导条件；利用钴离子吸附柱纯化了目的蛋白.该研究为开展F3'5'H酶的反应动力学、酶的器官组织定位等研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高丽萍	安徽农业大学生命科学学院	57	747	15.0	25.0
2	王云生	安徽农业大学生命科学学院	29	136	7.0	9.0
6	夏涛	安徽农业大学教育部茶叶生物化学与生物技术重点实验室	95	1588	23.0	35.0
7	刘亚军	安徽农业大学生命科学学院	16	69	5.0	7.0
8	赵磊	安徽农业大学教育部茶叶生物化学与生物技术重点实验室	8	27	3.0	4.0
9	陈啸天	安徽农业大学生命科学学院	1	3	1.0	1.0