脯氨酸4羟化酶在大肠杆菌中的密码子优化表达及对反式4羟脯氨酸生物合成的作用

• 作者: 刘合栋 张震宇 袁春伟
• 来源期刊: 生物加工过程
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组大肠杆菌 脯氨酸 4 羟化酶 反式 4 羟脯氨酸 密码子优化 发酵 条件优化
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与开发
• 页码范围: 44-51
• 页数: 8页
• 分类号: Q786
• 字数: 4631字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3678.2014.06.009

摘要

为了使脯氨酸4羟化酶基因在重组大肠杆菌中得到高表达，通过调整大肠杆菌密码子偏好性以及mRNA二级结构，使得脯氨酸4羟化酶基因得到优化。将优化后的脯氨酸4羟化酶基因插入含有色氨酸串联启动子的pUC19质粒，构建重组质粒pUC19 ptrp2 Hyp，并导入大肠杆菌BL21（ DE3）中。在摇瓶水平，重组菌以L 脯氨酸为底物发酵8 h，可积累（0?492±0?034） g／L 的反式4羟脯氨酸。在发酵罐水平，通过补料分批发酵来提高反式4羟脯氨酸的产量，当补糖速率为18 g／h时，反式4羟脯氨酸的产量高达42?5 g／L，反式4羟脯氨酸产率为0?966 g／（ L·h）。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张震宇	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	18	41	3.0	6.0
2	袁春伟	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	2	20	2.0	2.0
3	刘合栋	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	1	11	1.0	1.0