传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能研究

• 作者: 吴晓悠 唐雨德 张海彬 朱向东 欧阳伟 王忠灿 王永山 范红结 马金荣
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 传染性法氏囊病病毒 VP2基因 鸡补体C3d 分子免疫佐剂 基因免疫
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学
• 页码范围: 471-475
• 分类号: S852.65
• 字数: 3634字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2012.06.13

摘要

为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV) VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本研究根据已发表的鸡源补体C3d序列,设计并合成在5'端添加编码连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因.用同尾酶Bg1 Ⅱ和BamH Ⅰ构建含有3拷贝C3d与VP2基因融合的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d.用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,western blot分析表明,表达的重组蛋白为162 ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中具有特异性荧光.用pcDNA-VP2-3C3d与前期构建的pcDNA-VP2分别免疫2周龄SPF鸡,二免14 d后,间接ELISA法检测IBDV抗体效价,pcDNA-VP2-3C3d组抗体水平显著高于pcDNA-VP2组；MTT法检测鸡脾淋巴细胞增殖活性,pcDNA-VP2-3C3d组免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性显著高于pcDNA-VP2组(p＜0.05).本研究表明C3d可以增强VP2基因免疫诱导的IBDV特异性体液和细胞免疫应答.