产碱杆菌DN25中降氰酶的分离纯化及生化特性

• 作者: 刘幽燕 唐爱星 李青云 汪艳华 王顺成
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 产碱杆菌 降氰酶 分离纯化 酶特性 氰化物
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 108-114
• 页数: 7页
• 分类号: Q936|Q814.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1145.2012.00108

摘要

以一株可降氰的产碱杆菌DN25为酶来源,通过超滤、30 mg/mL硫酸鱼精蛋白沉淀、30％～70％硫酸铵盐析和Phenyl-Toyopearl 650M疏水层析等步骤,获得比活力为44 U/mg的纯化酶制剂.在确定酶浓度、反应时间等氰降解活力测定条件后开展酶学性质研究,试图为将来氰降解代谢机理的深入研究和菌株的基因工程改造提供理论基础.研究结果表明,此纯化酶催化氰化物水解的最适pH值为8.0,最适温度为30℃.该酶在pH 7.0～8.0区域稳定,而在pH＞9时会很快失活；在30℃保存10 h,酶活力保持稳定,高于60℃,酶快速失活.加入甘氨酸稳定剂,在60℃下保存20 min酶活仍可保留19.6％.酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数Km为3.11 mmol/L,最大反应速率Vmax为0.23 mmolL-1 min-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘幽燕		66	463	12.0	19.0
2	李青云		36	217	8.0	13.0
3	唐爱星		17	38	3.0	4.0
4	汪艳华		3	3	1.0	1.0
5	王顺成		5	14	2.0	3.0