鲤IGF2b基因内含子的克隆、基因组序列分析及慢病毒载体构建

• 作者: 刘伟 张建桥 徐跑 曲疆奇 梁政远 苏胜彦 董在杰 袁新华 马良骁
• 来源期刊: 中山大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 鲤 IGF2b 内含子 慢病毒载体
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 页码范围: 77-85
• 分类号: Q78
• 字数: 5935字
• 语种: 中文

摘要

为了了解鲤IGF2b基因与鲤生长性状之间的关系,以建鲤为试验材料,克隆了IGF2b基因内含子,分析其基因组序列的特点,构建了IGF2基因的慢病毒载体,同时观察其在293T细胞中的表达活性.结果获得鲤IGF2b 5 173 bp长度的基因组DNA序列(HM755899),共有3个内含子,4个外显子；在3′非翻译区存在2个CpG岛,在5′端非翻译区存在(T)n重复序列；除此之外,成功构建了慢病毒载体质粒Lenti-IGF2b-IRES-EG-FP,转染293T细胞后,产生的重组慢病毒颗粒出现高表达绿色荧光,荧光定量PCR检测发现IGF2b基因在293T细胞中高表达.这些结果将为研究IGF2b基因在多态性、表达方面与鲤生长性状之间的关联奠定基础.