新型冠状病毒双重荧光RT-PCR检测方法

• 作者: 刘丽娟 孙肖红 徐焕州 李辉 杨宇 杨鹏飞 王旺 王莎莎 王静 赵婷婷
• 来源期刊: 中国国境卫生检疫杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光PCR 新型冠状病毒 检测 交叉反应
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 实验研究与疾病监测
• 页码范围: 331-336
• 页数: 6页
• 分类号: R183.4
• 语种: 中文

摘要

目的 为快速检测新型冠状病毒,防控疫情的输入,建立一种快速的双重实时荧光RT-PCR检测方法.方法 对WHO公布的单重实时荧光RT-PCR检测引物和探针进行重新设计和优化,建立双重荧光RT-PCR反应体系,分别采用羧基荧光素(FAM)和绿色荧光蛋白(VIC)荧光基团标记探针,实现双基因的同时检测.结果 经优化的双重实时荧光RT-PCR方法有较好的灵敏度和特异性,对阳性对照质粒检测灵敏度为31拷贝/μl,检测健康和普通发热人员咽拭子以及流感病毒无交叉反应.结论 建立了双重实时荧光RT-PCR快速检测方法,提高检测效率和准确度的同时降低了成本,可用于新型冠状病毒的快速应急检测.