细粒棘球绦虫烯醇酶基因克隆表达及免疫诊断研究

• 作者: 伍卫平 周何军 张璟 徐馀信 曹建平 沈玉娟 王燕娟 王莹 袁忠英
• 来源期刊: 中国血吸虫病防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球绦虫 EgEno基因 克隆 表达 免疫诊断
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 549-552,556
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3+3
• 字数: 3281字
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆表达细粒棘球绦虫烯醇酶(EgEno)基因,并对其免疫诊断价值进行初步评价.方法 从细粒棘球绦虫cDNA中扩增目的基因,克隆入表达载体pET28a,转化E.coliBL21 (DE3),经异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达后,进行SDS-PAGE和免疫印迹法鉴定；采用细粒棘球蚴病及其他几种寄生虫病患者的血清和健康人血清,通过ELISA法评价重组EgEno抗原的免疫诊断效果.结果 重组质粒pET28a-EgEno构建成功.SDS-PAGE和免疫印迹法结果显示,重组蛋白在E.coliBL21 (DE3)中获得高效表达,重组蛋白EgEno相对分子量约为50 kDa,可被细粒棘球蚴病患者血清识别.EgEno对细粒棘球蚴病患者血清的免疫诊断敏感性为81.25％.结论 克隆出细粒棘球绦虫EgEno基因并在E.coliBL21(DE3)中表达,重组EgEno对细粒棘球蚴病有较好的免疫诊断价值.