副猪嗜血杆菌荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 沈志强 苗立中 韩文瑜
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 农学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 infB基因 SYBR Green Ⅰ 荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 85-89
• 页数: 5页
• 分类号: S852.612
• 字数: 3784字
• 语种: 中文

摘要

为了建立基于SYBR Green Ⅰ的快速检测副猪嗜血杆菌(HPS)的实时荧光定量PCR方法,参照GenBank公布的HPS的infB基因序列(DQ:781933.1),设计特异性引物；提取HPS基因组,进行PCR扩增,回收目的片段；构建阳性标准模板,建立标准曲线；验证其敏感性、重复性和特异性.结果显示,本试验得到了阳性标准质粒,并建立了标准曲线,线性关系在102 copies/μL～108 copies/μL检测范围内良好；该方法敏感性达到10 copies/μL,比常规PCR高100倍,重复性试验变异系数均小于2.5％,同时对HPS具有良好的特异性.结果表明,本试验建立的副猪嗜血杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法可用于临床对HPS的快速诊断和定量检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈志强		525	1950	18.0	25.0
2	韩文瑜	吉林大学畜牧兽医学院	159	1086	16.0	26.0
3	苗立中	吉林大学畜牧兽医学院	166	395	8.0	12.0