翻译调控肿瘤蛋白的原核表达及纯化

• 作者: 王景龙 许小敏 谷励 陈思嘉 陈智嘉
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 翻译调控肿瘤蛋白 原核细胞 基因表达 纯化
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1139-1142
• 分类号: R73-3|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达并纯化翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP).方法 以人乳腺癌细胞系MCF-7总RNA为模板,PCR扩增TCTP基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达.His Trap FF层析柱纯化重组蛋白后,进行Western blot鉴定.结果 克隆的目的基因序列正确,未发生碱基突变;重组表达质粒经双酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为20 000,主要以包涵体形式表达;纯化后纯度为80％,可与兔抗人TCTP多克隆抗体特异性结合.结论 已成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化了TCTP,为进一步研究其在肿瘤等疾病发生、发展及治疗中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈智嘉	吉林大学白求恩医学院药理学系	6	32	5.0	5.0
2	许小敏		3	1	1.0	1.0