MAGE-D4a融合蛋白的原核表达、纯化及鉴定

• 作者: 林文珍 林永达 罗彬 肖绍文 蓝秀万 谢小薰 贺菽嘉
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 黑色素瘤相关抗原-D4a 原核表达 纯化 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 432-435,440
• 分类号: R739.4
• 字数: 4469字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2010.05.011

摘要

目的:构建肿瘤相关抗原MAGE-D4a的原核重组体系,表达、纯化融合蛋白.方法:PCR法从胶质瘤组织cDNA中扩增MAGE-D4a基因全长编码区,连接入原核表达载体pMAL-c2,筛选、鉴定阳性克隆并测序.将重组质粒转化至大肠杆菌Rosetta(DE3)诱导表达,表达产物经Amylose Resin亲和层析分离纯化,并且对纯化的融合蛋白进行质谱鉴定.结果:成功扩增了MAGE-D4a基因;重组质粒在Rosetta大肠杆菌中诱导表达出MBP/MAGE-D4a融合蛋白;优化了MAGE-D4a原核表达体系的最适条件;蛋白质谱分析结果显示表达的基因重组蛋白与目的蛋白相符.结论:获得了高效表达、可溶性的MAGE-D4a重组蛋白,为抗体的制备及血清学分析奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢小薰	广西医科大学组织学与胚胎学教研室	71	221	8.0	11.0
2	肖绍文	广西医科大学第一附属医院神经外科	138	481	11.0	13.0
3	贺菽嘉	广西医科大学组织学与胚胎学教研室	19	92	5.0	8.0
4	林文珍	广西医科大学生物化学与分子生物学教研室	29	165	7.0	11.0
5	罗彬	广西医科大学组织学与胚胎学教研室	33	70	5.0	7.0
6	蓝秀万	广西医科大学生物化学与分子生物学教研室	29	201	8.0	13.0
7	林永达	广西医科大学组织学与胚胎学教研室	4	7	1.0	2.0