家蚕素Ⅱ基因原核表达及蛋白纯化

• 作者: 刘庆信 刘朝阳 崔为正 崔海波 张涛 徐欣 杨洋 郭晓琪
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕 类胰岛素肽 家蚕素 基因克隆 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 8-12
• 分类号: S881.2
• 语种: 中文

摘要

[目的]建立一种简便、快速且能大量获得家蚕素Ⅱ(bombyxin-Ⅱ,BBXⅡ)的有效方法.[方法]运用RTPCR技术得到bombyxin-Ⅱ基因全长cDNA序列,采用原核表达技术对该基因进行异源表达,并利用亲和层析的方法得到纯化的BBXⅡ蛋白.[结果]从家蚕Bombyx mori头部mRNA中经过反转录获得bombyxin-Ⅱ基因的cDNA,并构建了原核表达载体pET28a-BBXⅡ,经过异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,使BBXⅡ获得了大量表达,进一步用HisTrap HP亲和层析,成功得到大量纯化的BBXⅡ.[结论]本实验建立的原核表达方法和蛋白纯化技术,是大量制备BBXⅡ的一种简易而有效的方法,为进一步开展BBX的分泌机制和作用机理研究,以及利用原核表达系统研发BBX降血糖药物奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔为正	山东农业大学林学院	107	913	18.0	25.0
2	刘庆信	山东农业大学林学院	19	60	4.0	7.0
3	徐欣	山东农业大学林学院	9	27	4.0	5.0
4	郭晓琪	山东农业大学林学院	5	18	3.0	4.0
5	杨洋	山东农业大学林学院	6	4	1.0	2.0
6	崔海波	山东农业大学林学院	4	4	1.0	2.0
7	刘朝阳	山东农业大学林学院	4	22	2.0	4.0
8	张涛		1	4	1.0	1.0