Rabex-5基因RNAi慢病毒表达载体的构建及其在MCF-7中对Rabex-5表达的影响

• 作者: 厉红元 张翔 李焰 梁欣洁 潘雪 王颖建 闵捷
• 来源期刊: 重庆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: Rabex-5 RNA干扰 慢病毒载体 人乳腺癌细胞株MCF-7
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 34-38
• 分类号: R737.9
• 字数: 3843字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3626.2012.01.011

摘要

目的:构建Rabex-5 RNAi慢病毒表达载体,并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,观察其对Rabex-5基因的沉默效应.方法:将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列,连接入经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中,经转化DH5α感受态细胞并筛选出阳性克隆,测序鉴定.用293FT细胞包装产生慢病毒,感染MCF-7细胞,利用Real-time PCR和Western blot鉴定抑制Rabex-5表达的效果.结果:PCR与测序鉴定证实成功构建了Rabex-5 RNAi的慢病毒载体,转染MCF-7细胞后,与未干扰组和阴性对照组相比,Rabex-5的mRNA和蛋白表达下调,以RNAi3的沉默效应最佳.结论:成功构建了Rabex-5 RNAi慢病毒表达载体,其可使MCF-7细胞株Rabex-5表达下调,为进一步研究靶向Rabex-5 RNAi对乳腺癌细胞恶性生物学行为变化及基因治疗研究奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闵捷	重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科	8	17	3.0	3.0
2	厉红元	重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科	111	641	11.0	21.0
3	潘雪	重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科	6	2	1.0	1.0
4	李焰	重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科	7	13	2.0	3.0
5	王颖建	重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科	6	14	3.0	3.0
6	张翔	重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科	12	40	4.0	6.0