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摘要:
目的:构建Rabex-5 RNAi慢病毒表达载体,并转染人乳腺癌细胞株MCF-7,观察其对Rabex-5基因的沉默效应.方法:将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列,连接入经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中,经转化DH5α感受态细胞并筛选出阳性克隆,测序鉴定.用293FT细胞包装产生慢病毒,感染MCF-7细胞,利用Real-time PCR和Western blot鉴定抑制Rabex-5表达的效果.结果:PCR与测序鉴定证实成功构建了Rabex-5 RNAi的慢病毒载体,转染MCF-7细胞后,与未干扰组和阴性对照组相比,Rabex-5的mRNA和蛋白表达下调,以RNAi3的沉默效应最佳.结论:成功构建了Rabex-5 RNAi慢病毒表达载体,其可使MCF-7细胞株Rabex-5表达下调,为进一步研究靶向Rabex-5 RNAi对乳腺癌细胞恶性生物学行为变化及基因治疗研究奠定了实验基础.
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文献信息
篇名 Rabex-5基因RNAi慢病毒表达载体的构建及其在MCF-7中对Rabex-5表达的影响
来源期刊 重庆医科大学学报 学科 医学
关键词 Rabex-5 RNA干扰 慢病毒载体 人乳腺癌细胞株MCF-7
年,卷(期) 2012,(1) 所属期刊栏目 基础研究
研究方向 页码范围 34-38
页数 分类号 R737.9
字数 3843字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.0253-3626.2012.01.011
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 闵捷 重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科 8 17 3.0 3.0
2 厉红元 重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科 111 641 11.0 21.0
3 潘雪 重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科 6 2 1.0 1.0
4 李焰 重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科 7 13 2.0 3.0
5 王颖建 重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科 6 14 3.0 3.0
6 张翔 重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科 12 40 4.0 6.0
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研究主题发展历程
节点文献
Rabex-5
RNA干扰
慢病毒载体
人乳腺癌细胞株MCF-7
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
重庆医科大学学报
月刊
0253-3626
50-1046/R
大16开
重庆市渝中区医学院路1号
1976
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