羊布鲁茵16MvjbR蛋白酵母双杂交诱饵表达载体的构建及其毒性和自激活效应检测

• 作者: 屈海龙 张瑞 李晓燕 王兴龙 王景龙 王秀然 钱晶 陈思
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: vjbR蛋白 羊布鲁茵16M 自激活作用 酵母双杂交
• 年，卷（期）: 2012,（6）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 852-856
• 分类号: S852.614
• 语种: 中文

摘要

利用Sos招募系统（SRS），通过聚合酶链反应（PCR）扩增羊布鲁菌16MVjbR基因的编码序列，定向克隆到酵母表达载体pSos中，构建诱饵重组质粒pSos－VjbR，经测序正确后其将转入酵母菌cdc25H（α）感受态细胞，检测其表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无自激活作用。结果表明，经序列测定证实重组诱饵质粒pSos－VjbR构建成功。重组质粒转化入酵母细胞后，经检测其表达产物对cdc25H（α）酵母细胞无毒性作用，对报告基因亦无自激活作用。这为利用SRS来研究与羊布鲁菌16MVjbR蛋白相互作用的蛋白奠定了基础。