产L-苯丙氨酸工程菌的构建及不同碳源对其产量的影响

• 作者: 徐琪寿 芦佳 赵越 黄坤央 黄英武
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 生物学
• 关键词: 甘油激酶 核糖体结合位点 L-苯丙氨酸 发酵 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 124-127
• 分类号: Q789
• 字数: 3883字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2012.02.012

摘要

目的 构建L-苯丙氨酸高产工程菌株,并比较甘油和葡萄糖两种碳源对工程菌产L-苯丙氨酸的影响.方法 PCR克隆glpK基因,改变其核糖体结合位点(RBS)序列,分别与载体pZE12-AF连接,得到pZE12-AF-RBS Ⅰ-glpK和pZE12-AF-RBSⅡ-glpK两个重组质粒,再将它们分别导入E.coli MG△观察其 SDS-PAGE蛋白电泳;采用HPLC法检测在不同碳源中L-苯丙氨酸的产量.结果工程菌E.coli MG△pZE12-AF-RBSⅠ-glpK中甘油激酶表达量较工程菌E.coli MG△pZE12-AF-RBSⅡ-glpK有所提高;以甘油为碳源时,工程菌E.coli MG△pZE12-AF-RBSⅡ-glpK的L-苯丙氨酸产量分别是工程菌E.coli MG△pZE12-AF-RBSⅠ-glpK的14.16倍,工程菌 E.coli MG△pZE12-AF的3.18倍,E.coli MG△的63.31倍.以甘油为碳源时,工程菌苯丙氨酸产量高于以葡萄糖为碳源时的苯丙氨酸产量.结论 RBS的改变和glpK基因的表达有利于苯丙氨酸产量的提高,甘油较葡萄糖更适宜作为工程菌生长的碳源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄坤央	郑州大学药学院	3	6	2.0	2.0
5	芦佳	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	3	6	2.0	2.0
6	赵越	内蒙古农业大学食品科学与工程学院	7	6	2.0	2.0
7	徐琪寿	军事医学科学院放射与辐射医学研究所	61	580	13.0	22.0
8	黄英武	解放军306医院中心实验室	6	41	3.0	6.0