MultiSite Gateway技术在疟原虫条件性基因打靶载体快速构建中的应用

• 作者: 曹雅明 李娇娜 杜峰 梁佳元 王各各 罗恩杰 邓舒
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 疟原虫 质粒 基因打靶 MultiSite Gateway技术
• 年，卷（期）: 2012,（12）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 1068-1072
• 页数: 5页
• 分类号: R382.3
• 字数: 2655字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体.方法 以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MuhiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性重组,构建打靶载体pCHD-EBL-RFT,并对质粒酶切和测序鉴定.PCR扩增约氏疟原虫UIS4-5U片段,置换质粒PbUIS4/flp中原有同源臂,并通过位点特异突变技术,获取Avrll和Nhel两种线性化位点,构建插入载体PyU IS4/flp.结果 构建出打靶载体pCHD-EBL-FRT和PyUIS4/flp,酶切鉴定和测序分析正确.结论 将MultiSite Gateway技术成功地用于疟原虫条件打靶载体的构建,建立了以MultiSite Gateway技术为基础的打靶载体构建体系.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹雅明	中国医科大学基础医学院免疫学教研室	140	540	11.0	19.0
2	罗恩杰	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	76	405	11.0	17.0
3	王各各	中国医科大学基础医学院免疫学教研室	4	1	1.0	1.0
4	杜峰	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	4	4	1.0	1.0
5	梁佳元	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	2	1	1.0	1.0
6	李娇娜	沈阳市中医药学校基础教研室	8	8	2.0	2.0
7	邓舒	中国医科大学基础医学院病原生物学教研室	1	1	1.0	1.0