猪hepcidin基因质粒载体的构建及其在毕赤酵母中的表达

• 作者: 刘俊熙 卢敏 尹清强 左瑞雨 常娟 狄元冉 王潇 袁林 郑秋红
• 来源期刊: 江西农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪 hepcidin 毕赤酵母 基因表达
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 153-156
• 分类号: Q786
• 字数: 4075字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-8581.2012.04.045

摘要

为构建猪hepcidin毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌型表达栽体,实现其真核表达,本文采用RT - PCR方法获得猪肝脏中的铁代谢调节基因hepcidin,通过连接酶使其与真核表达栽体pGAPZaA相连构建重组表达质粒pGAPZaA - hepcidin.利用高压电击处理,使质粒栽体转入到毕赤酵母中,用含Zeocin抗生素的YPD平板筛选阳性转化子,并做PCR鉴定.结果表明:hepcidin基因准确地插入表达载体pGAPZaA,并已整合到酵母基因组中,并成功构建了酵母重组表达质粒.