PEDV和TGEV双基因共表达载体pVAXD-PS1-TS的构建及体外表达

• 作者: 唐莹 廖晓丹 文心田 曹三杰 黄小波
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 猪传染性胃肠炎病毒 S基因 构建 真核表达
• 年，卷（期）: 2012,（5）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 641-644
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

采用RT-PCR扩增猪传染性肠胃炎病毒（TGEV）SC-H株S基因N端主要抗原位点片段（大小约为1 916bp）和猪流行性腹泻病毒（PEDV）SC-L株S1基因（大小约为2 367bp）,插入pMDl9-T simple载体,经酶切与测序鉴定后,构建重组质粒pMD19-T-TS与pMD19-T-PS1。从T载体上将PS1、TS基因切下,以亚克隆方法插入双启动子真核表达载体pVAXD,构建能同时表达TGEV S基因和PEDV S1基因的重组质粒pVAXD-PS1-TS。对重组质粒进行PCR与酶切鉴定后,以脂质体转染法转染COS7细胞,间接免疫荧光检测转染后细胞外源基因的表达情况。结果表明,重组质粒构建正确且能够在COS7细胞中得到表达,转染的细胞呈现特异性荧光。真核表达质粒pVAXD-PS1-TS的成功构建为进一步研究PEDV和TGEV的二联核酸疫苗奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹三杰	四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川省动物疫病与人类健康实验室	89	524	12.0	17.0
2	黄小波	四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川省动物疫病与人类健康实验室	52	188	9.0	11.0
3	廖晓丹	四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川省动物疫病与人类健康实验室	3	6	1.0	2.0
4	唐莹	四川农业大学动物医学院动物传染病与基因芯片实验室四川省动物疫病与人类健康实验室	2	7	1.0	2.0