猪嵴病毒实时荧光定量RT-PCR方法的建立

• 作者: 修金生 李涛 王斌 陈小权
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪嵴病毒 SYBR GreenⅠ 实时荧光定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 922-926
• 分类号: S852.65
• 字数: 4119字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2012.09.013

摘要

目的 本研究根据GenBank中登录猪嵴病毒(porcine kobuvirus,PKV)株的3D蛋白序列基因特征,设计特异性引物,建立基于SYBR GreenⅠ检测PKV的实时荧光定量RT-PCR方法.结果 该方法检测PKV的3D基因在6.42×102 ~ 6.42×108拷贝/μL范围内有很好的线性关系,其扩增相关系数为0.999,扩增效率为100%,扩增产物的融解曲线分析只出现1个单特异峰,融解温度为(84.94±0.24)℃,对传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪圆环病毒、猪繁殖与呼吸综合症病毒、猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒均检测不到荧光信号,特异性强.所建立实时荧光定量RT-PCR方法组内变异系数为0.26%~1.14%,组间变异系数0.63%~1.79%,重复性好.结论 本方法的建立为PKV的早期诊断及定量分析PKV感染水平和确定感染靶器官提供新的检测方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	修金生	福建农林大学动物科学学院	33	150	7.0	11.0
2	李涛	福建农林大学动物科学学院	32	135	6.0	10.0
3	王斌	福建农林大学动物科学学院	11	116	6.0	10.0
4	陈小权	福建农林大学动物科学学院	6	63	5.0	6.0