结核分枝杆菌MycP1蛋白的原核表达及其对巨噬细胞的毒性作用

• 作者: 廖丹 杨晓玲 邓仪昊 鲍朗 黄丹丹
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 结核分枝杆菌 MycP1 巨噬细胞 细胞毒性
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 438-441
• 分类号: R378.91
• 字数: 2609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2012.04.004

摘要

目的:构建结核分枝杆菌MycP1蛋白原核表达系统.方法:构建pGEX-4T-1-Rv3883c重组质粒,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blot法检测目标蛋白的表达情况.目标蛋白经亲和层析纯化后,以不同质量浓度MycP1作用于小鼠巨噬细胞ANA-1,48 h后XTT法检测活细胞数,同时测定细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力,以评价其细胞毒性.结果:成功构建pGEX-4T-1-Rv3883c质粒,该质粒能在大肠杆菌中表达,经鉴定,表达的融合蛋白为目标蛋白MycP1.该融合蛋白作用后可使ANA-1活细胞数下降(F=34.327,P<0.001),培养上清液中LDH活力升高(F=336.720,P<0.001).结论:成功构建了MycP1原核表达系统,目标蛋白对巨噬细胞有一定的毒性效应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍朗	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	84	212	7.0	10.0
2	邓仪昊	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	15	34	4.0	5.0
3	黄丹丹	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	32	65	5.0	7.0
4	杨晓玲	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	15	73	6.0	8.0
5	廖丹	四川大学华西基础医学与法医学院感染免疫研究室	4	15	3.0	3.0